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分光光度计资料大全

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技术百科——分光光度计

分光光度计是一种能够测量光源波长与强度之间关系的光度计。分光光度计通常用于测量溶液、透明或不透明固体或者气体的透射率或反射率。分光光度计的使用范围横跨各种科研领域,如物理、材料科学、化学、生物化学和分子生物学。它们广泛应用于很多工业领域,包括半导体、激光和光学制造、印刷和法医检查,以及研究化学物质的实验室。

 

分光光度计常用的波长范围为:

(1)200400nm的紫外光区,

(2)400760nm的可见光区,

(3)2.525μm(按波数计为4000cm<-1>400cm<-1>)的红外光区。

 

所用仪器为紫外分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规定,定期进行校正检定。 单色光辐射穿过被测物质溶液时,被该物质吸收的量与该物质的浓度和液层的厚度(光路长度)成正比,其关系如下式:

A=-log(I/I)=-lgT=kLc

式中 :

A 为吸收度;

I为入射的单色光强度;

I 为透射的单色光强度;

T 为物质的透射比;

k 为吸收系数;

L 为被分析物质的光程

c 为物质的浓度


物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后,可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。在可见光区,除某些物质对光有吸收外,很多物质本身并没有吸收,但可在一定条件下加入显色试剂或经过处理使其显色后再测定,故又称比色分析。由于显色时影响呈色深浅的因素较多,且常使用单色光纯度较差的仪器,故测定时应用标准品或对照品同时操作。

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

結果